文章摘要:多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)是一种可以在单个反应中同时对50个靶基因进行定性和半定量分析的检测方法。其主要步骤包括靶序列DNA变性、探针和靶序列DNA杂交、连接酶连接探针、PCR扩增、毛细管电泳及数据分析。多重连接探针扩增技术已广泛应用于肿瘤的诊断与预后、遗传性疾病的基因检测、产前检测等领域。鉴于混合感染现象增加,敏感、特异和高通量检测方法是当前动物疾病检测中的急需,多重连接探针扩增技术在病原微生物的高通量检测领域显示出良好的应用前景。本文从多重连接探针扩增技术的原理和步骤、在病原微生物检测、肿瘤诊断和遗传性疾病诊断中的应用、优势和不足以及应用前景展望等方面进行综述,以期为MLPA技术在动物病原检测和疾病诊断中的应用和改良提供参考。

文章关键词:多重连接探针扩增技术(MLPA),甲基化特异性MLPA (MS-MLPA),病原体检测,肿瘤诊断,遗传疾病诊断,

项目基金:国家自然科学基金(31902249),科技部国家重点研发计划重大动物源性病原体传入风险评估和预警技术研究(2017YFC1200500),浙江省科技重点研发计划项目(2019C02043;2019C02052;2018C02028),国家级大学生创新创业训练计划(202110341042),浙江省基础公益研究计划(LQ19C180003,