文章目录

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.2 方法

    1.2.1 细胞培养和转染

    1.2.2 hTERT干扰片段的转染与筛选

    1.2.3 实验分组

    1.2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡

    1.2.5 RT-PCR检测Bcl-2、Bax、caspase-3、SP-1

    1.2.6 Western blot检测Bcl-2、Bax、caspase-3、SP-1蛋白表达

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 获得hTERT干扰的细胞

2.2 干扰hTERT增强光动力疗法对宫颈癌细胞的诱导凋亡

2.3 干扰hTERT联合光动力疗法降低Bcl-2、SP-1

2.4 干扰hTERT联合光动力疗法降低Bcl-2、SP-1蛋白表达和上调Bax、caspase-3蛋白表达

3 讨 论

文章摘要:目的:观察干扰hTERT对TMPyP₄光动力疗法诱导宫颈癌细胞发生凋亡的作用,并探索其机制。方法:筛选hTERT的有效干扰片段,并将其转染至宫颈癌Caski细胞和接受TMPyP₄-PDT的Caski细胞。AnnexinV-PE/7-AAD双染试剂盒检测细胞凋亡率,荧光实时定量PCR法、Western blot分别检测Bcl-2、Bax、caspase-3、SP-1基因mRNA和蛋白水平的表达。结果:成功筛选sh-4作为有效干扰片段用于后续实验,接受TMPyP₄-PDT的Caski细胞稳定转染此片段后,细胞凋亡率明显升高,Bcl-2、SP-1基因在mRNA水平和蛋白水平表达均减少,Bax、caspase-3基因在mRNA水平和蛋白水平表达均增加。结论:干扰hTERT基因可以增强光动力疗法（PDT）的效果,可能机制是通过降低靶基因Bcl-2、SP-1表达和增加Bax、caspase-3表达,进而加速细胞凋亡。

文章关键词:

论文DOI:10.13283/j.cnki.xdfckjz.2021.11.003

论文分类号:R737.33

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