文章摘要:目的 利用斑马鱼模型与代谢组学技术研究瓦他拉尼对血管生成的抑制作用,探索血管生成相关的内源性小分子代谢物。方法 采用受精后24 h（hour post fertilization,hpf）的Tg（VEGFR2:GFP）型转基因斑马鱼为实验动物,分为对照组、瓦他拉尼组和恢复组。瓦他拉尼组加入瓦他拉尼0.4μg/ml处理至72 hpf。恢复组加入瓦他拉尼0.4μg/ml处理12 h后移除药液,置正常培养液中培养至72 hpf。对照组置正常培养液中培养至72 hpf。用荧光显微镜观察每组斑马鱼胚胎节间血管的生长情况。收集各组斑马鱼,进行组织破碎、提取代谢物、衍生化处理,采用气相色谱质谱联用（gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）进行代谢组学分析。结果 瓦他拉尼处理斑马鱼48 h后,斑马鱼节间血管的生长被显著抑制（P<0.01）。先用瓦塔拉尼处理12 h后,在移除药物继续培养至72 hpf的斑马鱼节间血管出现明显恢复。代谢组学结果显示正常对照组、瓦他拉尼组和恢复组在偏最小二乘法-模式判别（PLS-DA）模型中可明显区分,进一步筛选出16种内源性小分子代谢物可能与斑马鱼血管生成相关,包括丙酮酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘油、磷酸、丝氨酸、脯氨酸、葡萄糖、天冬氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、酪氨酸、棕榈酸、硬脂酸和胆固醇。结论 瓦他拉尼对斑马鱼的节间血管生成具有显著的抑制作用,其抑制作用可能与影响血管生成过程的内源性小分子代谢物有关。

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